第七届北京罕见病学术大会暨2019京津冀罕见病学术大会征文（202)

1.  中国人民解放军总医院第一医学中心 临床检验科

2.  中国人民解放军总医院第一医学中心 儿内科

苑晓舟1  段晋燕1  孟岩2  梁爽1，姜文灿1，葛素君1 王成彬?1

通讯作者：王成彬

摘  要    

背景和目的  粘多糖贮积症（MPS）属于溶酶体贮积症（LSD）中最常见的一组疾病，是由于降解糖胺聚糖（GAGs）所需的溶酶体水解酶活性降低或失活，而导致GAG在患者组织细胞内累积，从而造成各组织器官功能损害的遗传代谢性疾病。目前，针对该病的实验室诊断主要有三种方式，尿液中GAG含量检测、细胞中酶活性检测和基因检测。但以上方法存在特异性较低、检测过程复杂或费用昂贵、检测周期较长等不足。因此，亟需探索新的生物标记物辅助该病的诊断、观察病情变化和治疗效果，并且为探索MPS致病机制提供线索。在前期实验中，我们通过双向电泳法筛选出MPSⅡ型患者与正常人尿液中存在差异的蛋白质，并利用质谱对蛋白种类进行鉴定，发现α1抗胰蛋白酶（α1-AT )在MPSⅡ型患者与正常人尿液中存在显著差异。因此进一步扩大样本量，研究黏多糖病（MPS）患者尿液中α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）含量，探讨尿液α1-AT含量与MPS的关系。

方法 选取2015年3月~2016年6月在解放军总医院儿童医学中心确诊的MPSⅠ型患者18例（MPSⅠ组），MPSⅡ型患者11例（MPSⅡ组）和本院查体儿童30例（健康对照组），收集晨尿，运用ELISA和Western Blot方法检测尿液中α1-AT含量。

结果 用ELISA方法检测MPSⅠ组尿液α1-AT/Cr比值为(57.65±10.43)mg/mmol， MPSⅡ组为(55.89±7.43) mg/mmol， 健康对照组为（33.32±3.59）mg/mmol，MPSⅠ组、Ⅱ组均显著高于健康对照组（P＜0.05），用Western Blot方法进行验证，结果与ELISA方法相一致。

讨论 α1-AT是一种含有碳水化合物的单链糖蛋白，主要由肝脏产生，也可以由单核细胞、巨噬细胞、肺泡细胞等合成。在体内发生炎症或感染时，α1-AT会对炎症细胞和细胞因子产生反应，从而含量升高3-4倍，以对抗各类细胞和细菌所释放过多的蛋白溶解酶， 保护正常组织细胞免受蛋白溶解酶的溶解损伤。本研究发现，与正常人相比，MPSⅠ型、Ⅱ型患者尿液中α1-AT含量存在显著性增高。而作为与炎症相关的急性相蛋白，α1-AT含量升高很有可能与该病所导致的炎症反应有关。还有可能与溶酶体酶的代偿性升高有关。由于MPS患者体内缺乏降解GAG的水解酶，GAG便会在溶酶体中累积，激发溶酶体中蛋白酶的代偿性分泌，继而刺激α1-AT增多以抑制蛋白分解酶对组织细胞的溶解损害。而GAG累积造成的细胞破坏，使得水解酶自溶酶体中溢出，更促进了α1-AT的产生。因此，α1-AT含量检测操作方便快捷，在MPS患者尿液中升高，可作为MPS辅助诊断指标。并且为MPS致病机制提供线索。