第八届北京罕见病学术大会暨2020京津冀罕见病学术大会征文（22)

天津医科大学总医院妇产科生殖中心

田烨  白晓红

摘要

目的：探讨经卵胞浆内单精子注射(ICSI)联合卵子激活技术(AOA)治疗后，仍表现反复多周期受精障碍患者的遗传学病因。

方法：本文研究对象为一对在辅助生殖技术治疗中反复受精失败的不孕夫妇。患者夫妇在第一次的体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗中，获卵15枚常规体外受精受精失败；第二次的IVF-ET治疗中，获卵12枚行卵胞浆内单精子注射(ICSI)仍然受精失败。本次治疗周期中，获卵15枚行ICSI，并使用钙离子载体A23187进行ICSI后的卵子激活，仍然全部卵子受精失败。取夫妇外周血进行拷贝数变异测序（CNV-seq）和全外显子测序技术寻找遗传学病因。对检测到的基因突变进行Sanger测序验证和核心家系验证（Trios）溯其家系样本，明确变异的来源及遗传方式并进行生物信息学分析探究其功能。

结果：CNV-seq未发现夫妇双方非整倍体及＞100Kb的微缺失或者微重复。全外显子测序在女方检测到WEE2基因的新发复合杂合突变c.1535+3A>G 和 c.946C>T（p.Leu316Phe）。WEE2基因突变导致的疾病名称为卵母细胞成熟缺陷 5 型(OMIM:617996)，是卵母细胞停滞在中期Ⅱ，导致受精失败为特征的常染色体隐性遗传的不孕症，该基因与人类受精障碍的关系在2018年被首次报道。本研究检测到的WEE2基因新发位点突变，经人群数据库查阅后均为新发变异且疾病数据库预测均有致病性。生物信息学分析发现新发突变可能影响WEE2蛋白结构。核心家系分析提示基因突变遗传方式符合常染色体隐性遗传模式。此外，表现，全外显子测序发现男方携带KLHL10基因杂合错义突变c.607G>A （p. Val203Ile），核心家系分析提示突变位点遗传自男方父亲，该突变与男方畸精子症和受精障碍表型之间的关系需要进一步的验证。

结论：IVF-ET发现了许多遗传病的新表型，如卵母细胞阻滞、受精障碍和胚胎发育停滞，拓展了遗传病的基因谱。我们推断本研究发现的WEE2基因新发位点的复合杂合变异与受精障碍相关，具体的分子机制有待进一步的功能实验证实。