第八届北京罕见病学术大会暨2020京津冀罕见病学术大会征文（47)

北京大学第一医院

王晓媛，王芳，丁洁

目的：建立二代测序结果阴性的X连锁Alport综合征基因诊断策略，提高该疾病的基因诊断率。

方法：选择一名诊断X连锁Alport综合征（依据皮肤IV型胶原α5链染色阴性）而二代测序未检测到COL4A5基因突变的男性患者为研究对象，经皮肤活检获得其皮肤标本进行成纤维细胞培养。用TRIzol法提取皮肤成纤维细胞RNA，经逆转录-PCR扩增COL4A5基因全部编码区，进而直接测序。

结果：该患者皮肤成纤维细胞检测到COL4A5基因r.609_r.610 ins[609+751_609+878](p.Gly204Valfs*7)变异；从外周血基因组DNA扩增测序COL4A5基因IVS10，发现c.609+879A＞G半合变异。该变异为深部内含子变异，尚未被报道，未在正常人群数据库（ExAC、1000G）中检出。

结论：分析X连锁Alport综合征皮肤成纤维细胞COL4A5基因mRNA，可以检测到该深部内含子变异，弥补了二代测序不能检测深部内含子变异的缺陷，提高了该疾病的基因诊断率。