十三届北京罕见病学术大会暨2025京津冀罕见病学术大会（159）

1.   肝病中心，首都医科大学附属北京友谊医院，消化健康全国重点实验室，国家消化系统疾病临床医学研究中心

2.   分子生物学实验室，北京市临床医学研究所，首都医科大学附属北京友谊医院

李艳萌^1，2，徐安健²，张伟¹，周冬虎²，欧阳琴²，訾化端²，张蓓²张宁¹，段维佳¹，

王晓明¹，赵新颜¹，欧晓娟¹，贾继东¹，黄坚²

【摘要】

目的：遗传性血色病（HH）是一种常见的遗传代谢性疾病，其特征为铁稳态失调而导致全身性铁过载。HFE 相关的血色病是由编码人类铁稳态调节因子（即HFE）基因的纯合突变所导致的，主要发生在欧美人群，但我国HH致病基因及热点突变仍不清楚。我们之前的研究发现中国HH主要为非HFE基因突变模式，然而仍有一定数量的HH患者的病因不明。我们近期在中国HH患者中发现了一种新的突变形式，即含SURP 和 G-补丁结构域蛋白2（SUGP2）的 p.(Arg639Gln) 突变，其突变频率较高。SUGP2 是一种潜在的 mRNA 剪接相关的抑制因子。然而SUGP2 的靶基因及其影响的铁代谢调控通路有待阐明。本文旨在研究该突变在HH中的致病作用及潜在机制。

方法：构建SUGP2敲低的细胞模型，转录组测序分析和RT-PCR法检测铁代谢相关基因的表达并筛选可变剪接转录本；RNA-蛋白pull-down-质谱分析和RNA免疫共沉淀实验鉴定SUGP2蛋白与转录本的结合；分别构建SUGP2 p.(Arg639Gln) 突变的体内外模型，观察肝细胞中铁沉积及HAMP的水平，并检测可变剪接分子的不同转录本的水平及铁代谢通路基因的表达差异；Sanger测序和全外显子组测序分析HH病人SUGP2 c.1916 G>A位点突变及其他与铁代谢相关基因的伴随突变。

结果：RNA 测序分析显示SUGP2 敲低导致 CIRBP 前体 mRNA 的异常可变剪接，从而增加了 CIRBP V1 的正常剪接形式，进而通过增强mRNA 稳定性和翻译来提高 BMPER 的表达。RNA-蛋白pull-down和RNA免疫共沉淀实验表明，SUGP2 通过 CIRBP c.492 的剪接位点突变抑制 CIRBP 前体 mRNA 的剪接，并且SUGP2对 CIRBP c.492 C/C 基因型相对于CIRBP c.492 T/C基因型的剪接更敏感。转染 SUGP2 p.(Arg639Gln) 载体的肝细胞中转录本CIRBP V1 和 BMPER 表达上调，而铁代谢调控通路中的pSMAD1/5 和 HAMP 表达下调。CRISPR-Cas9 介导的 SUGP2 p.(Arg639Gln) 敲入小鼠表现出肝脏铁沉积增加、总血清铁水平升高以及血清铁调素水平降低，以及肝脏细胞中的BMP/SMAD通路下调；并且转录本CIRBP V1/V3剪接增多诱导 BMPER水平上调。在 54 名原发性铁过载患者中，有 10 名（18.5%）患者携带SUGP2 p.(Arg639Gln) 突变并同时具有 CIRBP c.492 C/C 基因型，其肝脏表现出铁沉积增加及BMPER 表达上调。

结论：SUGP2 基因的 p.(Arg639Gln) 突变通过 SUGP2/CIRBP/BMPER 轴下调铁调素的表达，这可能代表了HH的一种新的致病机制，并可能构成我国HH的主要突变模式之一。