第十一届北京罕见病学术大会暨2023京津冀罕见病学术大会征文(032)

首都医科大学宣武医院 神经内科

温琪，张姝，孙亚南，王静思，王亚叶，谢乃容，

刘昊然，姜雨廷，邸丽，王敏，卢岩，笪宇威

目的：葡聚糖体肌病1型（Polyglucosan body myopathy type 1，PGBM1）是一种RBCK1基因突变引起的罕见常染色体隐性遗传疾病，表现为葡聚糖体贮积为特征的系统性疾病，包括骨骼肌/心肌受累、免疫缺陷或自身免疫炎症。本文报告2例携带RBCK1同义突变的轻症PGBM1患者。

方法：收集患者的临床、电生理、影像学及病理等资料。抽取患者及其父母外周血，应用二代测序（Next generation sequencing，NGS）及Sanger测序技术进行基因突变筛查及家系验证。采用多序列对比分析基因序列的保守性，利用PolyPhen-2、SpliceAI等软件进行突变致病性预测，通过RNA-seq、Western blot验证突变致病性。

结果：患者1为39岁女性，自22岁起出现慢性进行性加重的对称性双下肢近端无力。患者2为49岁女性，同样表现为近10年逐渐加重的下肢近端无力，近一年出现上肢近端无力。二者肌电图均提示肌源性损伤。肌肉核磁可见双侧臀大肌、股肌、半腱肌、大收肌对称选择性受累。肌酸激酶、免疫、心脏相关检查未见明显异常。两例患者的肌肉病理有类似表现，肌纤维大小不等，较多肌纤维内可见空泡，其内有异常物质沉积。PAS染色可见类支链淀粉样包涵体分布于胞浆内，不能被唾液酸消化。空泡内物Dysferlin、Desmin、Ubiquitin、p62染色深染。通过电镜观察沉积物超微结构，可见肌原纤维间存在大量的纤维状葡聚糖体“湖”。NGS发现两例患者均存在RBCK1基因变异，患者1存在复合杂合变异（NM_031229: c.756G>A (p.Gln252=)， c.969C>A (p.Cys323Ter)），患者2携带与患者1相同的纯和同义突变位点（NM_031229: c.756G>A (p.Gln252=)）。Sanger测序证实变异分别来自其父母。其中，同义突变位点c.756 G>A 经ACMG评级为意义未明变异，但因其位于第6外显子末位碱基，高度怀疑会影响剪切。同源序列比对提示该位点高度保守，多个软件预测有害并可能影响剪切。患者1肌肉组织RNA-Seq分析揭示，该同义突变导致部分转录本6-7内含子剪切异常，第6外显子末端14bp缺失 (c.743_756del)，但仍有部分转录本可正常剪切。Western blot证实2例患者骨骼肌中RBCK1蛋白质有表达，但较正常人有所减少。

结论：本研究报道了首例同义突变所致成人起病的轻症PGBM1，较目前文献中所报道的其他PGBM1病例表型较轻，这与同义突变位点仅影响部分转录本剪切、仍有一些RBCK1蛋白能被正常翻译并发挥功能有关。

关键词：葡聚糖体肌病，RBCK1，同义突变