第九届北京罕见病学术大会暨2021京津冀罕见病学术大会征文（166）

郑州大学第一附属医院神经内科

胡正威 毛澄源 王辉 张槊 史长河 许予明

通信作者：许予明

 目的：线粒体功能障碍与帕金森病(PD)的发病机制有关，研究表明调节线粒体动力学可以减轻帕金森病相关损伤。热休克蛋白 70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)是线粒体动力学的关键调控因子，其突变或表达缺失与多种神经系统疾病有关。此外，CHIP还与 α-synuclein、Parkin和 LRRK2相互作用，进一步表明 CHIP参与 PD相关通路。本研究旨在探讨 CHIP在 PD细胞和小鼠模型中的保护作用。

 方法：使用 SH-SY5Y 细胞系，转染 CHIP-WT 质粒构建 CHIP 过表达模型，转染 shRNA 构建CHIP 敲减和对照模型。用 MPP+处理构建 PD体外细胞模型。用线粒体裂变抑制剂 1(Mdivi-1）处理后测定细胞活力、LDH水平、ATP产生及线粒体形态。尾静脉注射腺相关病毒（AAV）

介导 CHIP蛋白在小鼠脑组织过表达，还建立了基于 Nestin-cre/loxp驱动的 CHIP过表达的基因敲入小鼠，而后构建 MPTP诱导的急性帕金森病动物模型，爬杆实验、疲劳转棒实验、旷场实验检测 MPTP诱导急性帕金森病小鼠的行为学改变；免疫荧光、免疫组化检测组织病理学改变；Western Blot检测蛋白表达水平。

 结果: 细胞实验表明 CHIP可减轻 MPP+对细胞的损伤，调节 Bcl-2/Bax比值，阻止 MPP+诱导的 Drp1上调，改善 MPP+引起的线粒体碎片化。通过尾静脉注射 AAV/BBB载体病毒使 CHIP蛋白在野生型小鼠脑组织中过表达，腹腔注射 MPTP 后成功构建急性帕金森病小鼠模型。CHIP过表达改善了 MPTP诱导的运动障碍，缩短了 MPTP诱导的急性帕金森病小鼠爬杆实验所用时间，疲劳转棒实验掉落潜伏期延长，旷场实验中自发活动增加；CHIP 蛋白过表达能够改善 MPTP引起的中脑黑质区多巴胺能神经元死亡、TH蛋白降低；CHIP蛋白过表达能够抑制 MPTP引起的中脑黑质及纹状体 DRP1水平升高。

 结论：过表达 CHIP可以阻止 MPP+诱导的 SH-SY5Y细胞损伤，并通过调节 CHIP下游的 Drp1分子来改善 MPTP处理小鼠的运动功能。CHIP与 Drp1之间的相互作用以及其在 PD中的作用仍需进一步研究。