第十一届北京罕见病学术大会暨2023京津冀罕见病学术大会征文(020)

1.国家儿童医学中心，首都医科大学附属北京儿童医院神经内科

2.首都医科大学宣武医院儿科

3.赛福解码（北京）科技有限公司

4.郑州大学第三附属医院儿科

刘志梅¹，邹颖²，王佳³，鲍成佳³，佟笑¹，王俊玲⁴，段若愚¹，

韩萧迪¹，宋天羽¹，徐超龙¹，王明钊¹，蒋华芳¹，段昕¹，赵丹¹，

代丽芳¹，徐曼婷¹，方方¹

目的：探讨皮肤成纤维细胞RNA测序在线粒体病中的应用价值。

方法：获取88例皮肤成纤维细胞样本（3例无神经系统疾病，85例为线粒体病，其中未确诊41例，已有候选基因/变异38例，确诊6例），皮肤成纤维细胞RNA使用RNeasy试剂盒提取，使用Agilent 2100 BioAnalyzer进行RNA完整性值（RIN）检测。利用illumina测序平台进行RNAseq测序，测序模式为：150PE， Q30>85%，测序量>12G。

结果：在85例线粒体病中，最常见的为Leigh综合征，其次为发育性癫痫性脑病、遗传性白质脑病及其他。RNA测序共发现32件异常事件，包括异常表达（AE）、异常剪切（AS）、单等位基因表达（MAE）。在未确诊的41例病人中，共有9例异常事件，发现5例ECHS1候选基因、1例TBK1候选基因和1例HOX家族基因异常表达，将线粒体病诊断率提高12%（5/41），除此之外，进行进一步功能研究，有望进一步提高诊断率；已有候选基因的38例病人中，共有18例异常事件，帮助确定意义未明变异致病性，增加功能学证据，另外20例未发现异常事件，其中2例内含子区候选变异未导致RNA异常剪切或表达，致病性未明，可能非候选变异；确诊的6例病人中，除一例阴性外，其余均发现异常事件，进一步增加功能学证据。

结论：皮肤成纤维细胞RNA测序在线粒体病诊断中有一定的应用价值，结合DNA测序不仅可帮助确定意义未明变异致病性，增加功能学证据，而且有助于发现新的致病基因或异常代谢通路，辅助线粒体病诊断。