作者:刘志梅 等 日期:2023-11-01 浏览量:71
第十一届北京罕见病学术大会暨2023京津冀罕见病学术大会征文(030)
1.国家儿童医学中心,首都医科大学附属北京儿童医院神经内科
2.浙江省人民医院,杭州医学院附属人民医院检验医学中心
3.温州医科大学检验医学与生命科学学院
4.福君基因生物科技有限公司
目的:报道线粒体脑肌病伴乳酸酸中毒和卒中样发作(MELAS)综合征新的致病位点m.3571_3572ins/MT-ND1。
方法:回顾并总结诊断为MELAS综合征患者的病史,对肌肉进行线粒体呼吸链酶活性测定,皮肤活检进行细胞培养,从患者来源的成纤维细胞中收集具有不同m.3571_3572insC突变比例的成纤维纤维细胞克隆,并进行功能测定。
结果:通过肌肉线粒体呼吸链酶活性测定证实患者存在复合物I缺陷,根据线粒体信使RNA基因变异分类标准解读指南,通过基因数据再分析,将m.3571_3572ins/MT-ND1作为患者的候选变异。收集三个具有不同m.3571_3572ins/MT-ND1突变比例的细胞克隆来评估线粒体功能,蓝绿温和凝胶电泳(BN-PAGE)示m.3571_3572ins导致线粒体复合物I缺陷,氧耗率(OCR)、ATP和乳酸测定示m.3571_3572ins导致细胞生物能学受损,而随着突变比例的增加,线粒体膜电位降低,线粒体活性氧产生增加。通过竞争性细胞生长测定,与野生型相比,突变细胞的生长能力受损。
结论:在MELAS综合征发现了一种新的致病位点m.3571_3572ins/MT-ND1,该变异通过降低复合物I活性影响线粒体功能,扩大了线粒体病MELAS的遗传谱。