第十三届北京罕见病学术大会暨2025京津冀罕见病学术大会（027）

1. 中日友好医院呼吸中心呼吸与危重症医学科

2. 中国医学科学院北京协和医学院

3. 首都医科大学

侯金坤 1，2   崔烨 3   代华平 1，2 *   王辰 1，2 *   

[目的] 研究HAVCR2^high肺泡巨噬细胞亚群的异常活化和迁移驱动矽肺纤维化发生发展。

[方法] 检索矽肺组织单细胞测序数据，分析HAVCR2异常高表达的巨噬细胞亚群。选择矽肺（Silicosis）患者肺组织为观察组，肺移植供体肺组织为对照组；采用二氧化硅悬浊液诱导雄性C57BL/6小鼠42天构建矽肺纤维化模型，并给予HAVCR2抑制剂治疗。构建HAVCR2基因敲除小鼠，探究HAVCR2敲除对矽肺小鼠肺纤维化严重程度的影响。二氧化硅悬浊液处理肺泡巨噬细胞系（M-HS）以及原代肺泡巨噬细胞构建巨噬细胞活化模型，给予HAVCR2-siRNA沉默HAVCR2的表达，探究HAVCR2表达对巨噬细胞的活化和迁移的调节作用及分子机制。

HE、马松染色法观察肺组织形态和胶原沉积情况，免疫组化法检测矽肺组织中HAVCR2表达水平。流式细胞术检测肺组织中肺泡巨噬细胞与HAVCR2的共表达，免疫共沉淀法结合质谱检测HAVCR2与直接作用分子结合水平，Western Blot法检测肺组织和细胞中HAVCR2蛋白水平，细胞通路和分子的激活情况。

[结果] 单细胞测序数据发现矽肺组织HAVCR2的水平显著高于对照肺组织，HAVCR2高表达于一群巨噬细胞亚群；矽肺6周小鼠肺组织肺泡结构紊乱，出现矽结节，肺间质纤维化和肺纤维化区域显著胶原沉积。在矽肺患者和小鼠肺组织中， HAVCR2的表达水平显著升高，与肺泡巨噬细胞的标志物存在共定位。给予HAVCR2抑制剂治疗后，小鼠的肺纤维化程度明显改善，抑制了PLD通路的激活及巨噬细胞迁移相关基因的表达。HAVCR2基因敲除矽肺小鼠的肺纤维化程度明显减轻。SiO2悬浊液处理后M-HS细胞后HAVCR2的表达水平与对照组相比显著上调，给予慢病毒介导的RNA干扰HAVCR2的表达后可抑制巨噬细胞M2型活化标记蛋白及趋化能力。信号通路研究发现HAVCR2通过PLD2/PA信号通路调节巨噬细胞的迁移和活化

[结论] ?本研究首次发现HAVCR2high巨噬细胞亚群在矽肺发病中的关键作用，阐明了HAVCR2/PLD2/PA信号通路在调控巨噬细胞活化和迁移中的分子机制，为矽肺防治提供了新的潜在干预靶点。HAVCR2?^high巨噬细胞亚群发生了异常活化和迁移，在矽肺纤维化的发生与发展中发挥了关键作用。